طرز تهیه كريستال ويوله و کاربرد آن

كريستال ويوله

 طرز تهيه: ۱۴گرم كريستال ويوله را در ۱۰۰ ميلي ليتر الكل ايزوپروپيل۹۵% حل كرده و محلول را دو روز به حال خود گذاشته، سپس صاف مي كنيم، اين محلول، محلول ذخيره است.براي استفاده در باكتري شناسي، محلول را تا ۱۰ برابربا آب مقطر رقيق مي كنيم.

 كاربرد:رنگ آميزي گرم براي باكتري ها، رنگ آميزي بافت كوتين وچوب پنبه

طرز تهیه سافرانين و کاربرد آن

سافرانين

 طرز تهيه: يك گرم رنگ خشك را در محلول الكل ۵۰% حل مي كنيم سپس۱۰ميلي ليتر آب مقط اضافه مي كنيم تا محلول۱% تهيه شود.

 كاربرد:رنگ آميزي ليگنين ، سوبرين  كه به رنگ قرمز در مي آيند سلولززرد رنگ

دو روش فيكسه كردن بافت ها

دو روش فيكسه كردن بافت ها

الف – فيكساتور بون (  Bouin) : براي بافت هاي جانوري كاربرد دارد.

طرز تهيه : محلول اشباح شده اسيد پيكريك را با ريختن 2گرم از آن در 100 ميلي ليتر آب مقطر سرد تهيه كرده و سپس آن را صاف مي كنيم، به اين محلول 6 ميلي ليتر اسيداستيك گلاشيال و 30 ميلي ليتر فرمالين تجارتي (40% ) اضافه مي كنيم، ماده اي را كه در اين محلول مي اندازيم در فاصله 12 تا 48 ساعت ثابت مي شود، اما اگر مدت بيشتري هم در اين حال بماند اشكالي ندارد.( البته براي نگهداري درازمدت، بايد ماده را به درون الكل 70% انتقال داد.)

ب – فيكساتور فرمالين- الكل : براي بافت هاي گياهي كاربرد دارد.

 6 ميلي ليتر فرمالين 40% و 100 ميلي ليتر الكل 70% را مخلوط كرده، ماده مورد نظر را در مدت 24 ساعت در اين محلول مي اندازيم.براي نگهداري درازمدت، ماده را به الكل 70% انتقال مي دهيم.

طرز تهیه محلول فیکساتورFAA (فرمالين- اسيد استيك – الكل) و کاربرد آن

محلول فیکساتورFAA (فرمالين- اسيد استيك – الكل)

 طرز تهيه: ۵۰ سی سی الکل اتانول ۹۰ % را با مقدار ۱۰ سی سی فرمالين ۴۰% مخلوط کرده بعد مقدار ۴۰سی سی آب به آن می افزاییم .سپس ۲ ميلي ليتر اسيد استيك گلاسيال و۲۵ميلي ليتر فرمالين تجارتي (۴۰%)به آن اضاف مي كنيم.

 كاربرد: برای نگهداری بافت های گیاهی،تثيبت كننده اندام هاي گياهي

طرز تهیه آب دريا  و کاربرد آن

آب دريا

 طرز تهيه: ۴۵گرم كلريد سديم+ ۵گرم سولفات منيزيم+۵گرم كلريد منيزيم +۲گرم سولفات پتاسيم هر كدام از اين مواد را بايد جداگانه در مقداري آب مقطر حل كرده و سپس به همديگر افزوده و بشدت تكان داده شود، به اين محلول بهتر است به مدت ۴۸ ساعت هوا داده شود.

 كاربرد:براي نگهداري جانداراني كه ساكن آب دريا هستند

طرز تهیه محلول هم غلظت با خون پستانداران

محلول هم غلظت با خون پستانداران

 طرز تهيه: ۶گرم كلريد سديم را در يك ليتر آب مقطر حل مي كنيم.

طرز تهیه محلول رينگر  و کاربرد آن

محلول رينگر

 طرز تهيه:

الف ) قورباغه : مواد زير را در يك ليتر آب مقطر حل مي كنيم :

۳/۰ گرم كلريدكلسيم+۲۵/۰گرم كلريد پتاسيم+۵/۶ گرم كلريد سديم.

ب ) پستانداران : مواد زير را در يك ليتر آب مقطر حل مي كنيم :

۳/۰ گرم كلريد كلسيم+۲۵/۰گرم كلريدپتاسيم+۵/۸گرم كلريد سديم.

 كاربرد:براي نگهداري بافت هاي زنده جانوري

طرز تهیه معرف بارفورد

معرف بارفورد

 طرز تهيه: ۳/۱۳گرم استات مس را در ۲۰۰ ميلي ليتر آب حل كرده و ۸/۱ ميلي ليتر اسيد استيك گلاسيال اضافه مي كنيم

طرز تهیه محلول ۵% α- نفتول در اتانول و کاربرد آن

محلول ۵% α- نفتول در اتانول

 طرز تهيه: ۵گرم α- نفتول را در مقداري الكل اتيليك حل كرده وحجم آن را به ۱۰۰ ميلي ليتر مي رسانيم

 كاربرد:براي رنگ آميزي اينولين(در غده هاي ريشه اي گل كوكب، بنه ،غده زعفران وغده لاله) كه به رنگ بنفش در مي آيد

طرز تهیه محلول نين هيدرين  و کاربرد آن

محلول نين هيدرين

 طرز تهيه: ۲/۰ گرم نين هيدرين را در ۱۰۰ ميلي ليتر آب مقطر حل مي كنيم.

 كاربرد:براي جستجوي پروتئين ها(معرف اسيد آمينه) در روش اسپكترومتري وتعيين مقدارپروتئين نمونه كاربرد دارد

توجه : نين هيدرين ماده اي سرطان زاست، در كاربرد آن بايد دقت بسيار كرد. در تماس باپوست به زودي از بين نمي رود چرا كه بدن داراي اسيد آمينه بوده وبه رنگ بنفش در مي آيد.

طرز تهیه رنگ ليشمن و کاربرد آن

رنگ ليشمن

 طرز تهيه: ۱۵/۰گرم رنگ ليشمن خشك+۱۰۰ ميلي ليتر الكل متانول(سمي ومرگ آور)

 كاربرد:رنگ آميزي گلبول ها(گلبول ها به رنگ صورتي وهسته گلبول هاي سفيد آبي رنگ مي شود)

طرز تهیه لاكتوفنل

لاكتوفنل

طرز تهیه : مقادير مساوي(وزني) فنل (بلورها)، گليسرول، اسيد لاكتيك و آب مقطر را با هم مخلوط مي كنيم.

طرز تهیه ائوزين و کاربرد آن

ائوزين

 طرز تهيه: ( محلول آبي : يك گرم ائوزين+ ۹۹ ميلي ليتر آب مقطر)

( محلول الكلي : يك گرم ائوزين+ ۹۹ ميلي ليتر الكل اتانول ۷۰% )

 كاربرد:رنگ آميزي سيتوپلاسم سلول هاي جانوري- رنگ آميزي ديواره سلولي

طرز تهیه اندوفنل و کاربرد آن

اندوفنل

 طرز تهيه: ۵/۲ گرم از۶،۲ دي كلروفنل را در ۲۵۰ ميلي ليتر آب مقطر حل مي كنيم.

 كاربرد:شناسائي ويتامين c (در نمونه مورد آزمايش كه بعلت خاصيت احياءكنندگي ويتامين c در صورت موجود بودن اين ويتامين در محيط بي رنگ مي شود.

طرز تهیه  استو اورسئين(محلول تازه به رنگ آلبالوئي سير است) و کاربرد آن

استو اورسئين(محلول تازه به رنگ آلبالوئي سير است)

 طرز تهيه: ۱۰۰ميلي ليتر اسيد استيك غليظ+ ۳/۳گرم اورسئين

اورسئين در اسيد ضعيف خراب مي شود، بنابراين بهتر است كه آن را با رنگ خشك تهيه كنيم، يا آنكه محلول غليظ را نگهداري كنيم و به هنگام لزوم مقداري از آن را رقيق نمائيم.

 كاربرد:مشاهده مراحل تقسيم ميتوز وكروموزوم ها

طرز تهیه  سودانIII (سياه) و کاربرد آن

سودانIII (سياه)

طرزتهيه:    ۵۰  ميلي ليتر استون را به ۵۰ ميلي ليتر الكل اتانول ۷۰% افزوده و سپس سودانIII را تا رسيدن به حد اشباع در محلول حاصله بريزيد، بدين ترتيب محلولي۲/۰درصد فراهم مي آيد.

 كاربرد:براي رنگ آميزي چربي ها وليپوسيت ها

طرز تهیه محلول بیسمارک و کاربرد آن

تهیه محلول بیسمارک

طرز تهيه: یک گرم پودر قهوه ای بیسمارک را در۱۰۰سی سی الکل اتانول ۸۰ % حل می کنیم.

كاربرد:در مدت نيم دقيقه  بافت هاي سلولز ي را به رنگ زرد متمايل به قهوه اي در مي آورد

طرز تهیه  محلول سبز متیل  يا وردو متيل و کاربرد آن

محلول سبز متیل  يا وردو متيل

طرز تهيه: یک گرم پودر تجارتی را در ۲۰ سی سی الکل ۸۰ درجه حل کرده و با آب مقطر حجم آن را به ۱۰۰ سی سی میرسانیم .

كاربرد: برای رنگ کردن بافت های چوبی گیاهان در مدت يك دقيقه(بافت چوب به رنگ سبز در مي آيد)

طرز تهیه قرمز خنثی و کاربرد آن

تهیه قرمز خنثی

طرز تهيه: یک گرم پودر آن را با ۱۰۰ سی سی آب مقطر مخلوط کرده و به هم زده تا محلول یک در صد بوجود بیاید .

كاربرد: برای مشاهده واکوئل ها درپارامسی

طرز تهیه تهیه محلول قرمز کنگو و کاربرد آن

تهیه محلول قرمز کنگو

طرز تهيه: یک گرم پودر آن را در ۱۰۰سی سی آب مقطر حل می کنیم.

كاربرد: برای رنگ کردن بافت های سلولزی (در مدت ۱۵ دقيقه سلولز به رنگ قرمز يا نارنجي در مي آيد)

در پايان كار نمونه ها را با آب مقطر وسپس با الكل ۹۰%شستشو مي دهيم

طرز تهیه سبز ید و کاربرد آن

تهیه سبز ید

طرز تهيه: یک گرم سبز ید را در۱۰سی سی الکل ۷۰ درجه حل می کنیم.

كاربرد: برای رنگ آمیزی بافت های سلولزی در۳۰ثانیه

طرز تهیه بلودومتیلن(متيلن بلو) و کاربرد آن

تهیه بلودومتیلن(متيلن بلو)

 طرز تهيه:  نیم گرم پودر تجاری بلودومتیل را در یک لیتر آب مقطر حل می کنیم.

كاربرد: براي رنگ آميزي بافت هاي مرده(چوب)،در سلول هاي جانوري براي رنگ آميزي سيتوپلاسم وهسته

طرز تهیه استو کارمن  و کاربرد آن

تهیه استو کارمن

 طرز تهيه: يك گرم كارمن را با ۴۵ ميلي ليتراسيد استيك مخلوط كرده و آب مقطر اضافه كرده تاحجم آن به۱۰۰ميلي ليتر برسد ، مخلوط را تادرجه جوش حرارت داده و سپس سرد و صاف مي كنيم.

 كاربرد: برای رنگ آمیزی کروموزم ها وهسته سلول ها

طرز تهیه محلول لوگل و کاربرد آن

محلول لوگل

 طرز تهيه: ۶ گرم يديد پتاسيم(يدور پتاسيم ) را در۲۰۰ ميلي ليتر آب مقطر حل كرده، بلورهاي يد را به آن افزوده( 3 گرم) و آنگاه به كمك آب مقطر حجم را به يك ليتر مي رسانيم

 - لازم است محلول مزبور ۲۴ساعت قبل از به كاربردن تهيه شود، چون يد به آرامي در آب حل مي شود.

- محلول لوگل را مي توان در شيشة موادشيميايي قهوه اي رنگ تا مدتي در آزمايشگاه نگهداري كرد.(در اثر نوربي رنگ مي شود)

 كاربرد: برای تست نشاسته(آبي تيره)، بی حرکت کردن تاژکداران و مشخص کردن هسته درسلول هاي

  روپوست

طرز تهیه كارمن بدون زاج و کاربرد آن

كارمن بدون زاج

 طرز تهيه: ۲ گرم كارمن بدون زاج رادر۳۰۰ ميلي ليتر آب مقطر حل وسپس حرارت ملايم مي دهيم وبعد آنقدر زاج سفيد(سولفات مضاعف آلومينيم پتاسيم)مي افزايم تا رنگ قرمز تيره گردد ،بعد صاف  مي كنيم(دوام بيشتري دارد)

 كاربرد:رنگ آميزي پارانشيم گياهي ودستجات آوند آبكش

طرز تهیه محلول کارمن زاجی و کاربرد آن

محلول کارمن زاجی

 طرز تهيه: به مدت ۲-۱دقیقه در یک بشر ۴ گرم زاج پتاس(زاج آمونياكي) در ۱۰۰ميلي ليترآب حل می کنیم و بوسیله چراغ الکلی آن را به جوش می آوریم سپس یک گرم کارمن قرمز را در هاون سائيده به زاج در حال جوش اضافه می کنیم.۲۰دقیقه بجوشد و پس از سرد شدن آن را با کاغذ صافی، صاف کرده و چند قطره اسید فنیک (برای جلوگیری از فساد) به آن اضافه می کنیم.

كاربرد: برای رنگ آمیزی بافت های سلولزی در مدت ۱۵دقیقه (قرمز آلبالوئي)

طرز تهیه محلول فوشين اسيد

محلول فوشين اسيد

 طرز تهيه: يك گرم رنگ خشك فوشين را در محلول الكل ۵۰% حل مي نمائيم

طرز تهیه محلول فوشین آمونياكي و کاربرد آن

محلول فوشین آمونياكي

 طرز تهيه: مقداري محلول آمونياك را در الكل ۹۶درجه حل ميكنيم قطره قطره آمونياك اضافه كرده تا بي رنگ شود

 كاربرد:رنگ آميزي كوتين وچوب پنبه(قرمز رنگ)

طرز تهیه محلول فوشین قلیایی و کاربرد آن

محلول فوشین قلیایی

 طرز تهيه: یک گرم فوشین قلیایی را در ۱۰۰سی سی آب مقطر به آن حل می کنیم.

 كاربرد: برای رنگ آمیزی بافت های سلولزی در مدت ۵ ثانیه (قرمز رنگ)

طرز تهیه محلول گیمسا و کاربرد آن

محلول گیمسا

 طرز تهيه: یک گرم پودر گیمسا را با ۶۰ سی سی گلیسیرین مخلوط نموده و به مدت یک ساعت در گرم خانه ۶۰ درجه گرما نگهداری می کنیم. پس از خروج ۶۶سی سی الکل متیلیک ۹۷درجه به آن اضافه می کنیم. این محلول به نام محلول ذخیره گیمسا است . به هنگام استفاده ۵/۲ سی سی از این محلول را با ۳ميلي ليترالکل متیلیک مخلوط کرده و ۱۰۰ سی سی آب مقطر به آن اضافه می کنیم.

كاربرد: برای رنگ آمیزی گلبول های سفید (هسته به رنگ بنفش در مي آيد)

طرز تهیه فهلینک و کاربرد آن

تهیه فهلینک

 طرز تهيه:

محلول : a

۶/۳۴ گرم سولفات مس متبلور را در مقدار کمی آب مقطر به کمک حرارت حل کرده و حجم آن را به۵۰۰ سی سی می رسا نیم.(اگر محلول كدر بود يكي دو قطره اسيد سولفوريك غليظ به آن اضافه مي كنيم)

محلول :b

۱۷۳ گرم تارتارات سدیم پتاسیم (نمک راشل) را در کمی آب حل کرده و ۱۰۰سی سی سود ۱۵% بدان می افزائیم و حجم محلول را به ۵۰۰سی سی  می رسانیم.

 كاربرد: برای شناسائي هيدرات هاي كربن (محلول گلوكز به رنگ سبز در مي آيد)

طرز تهیه محلول بندکیت  و کاربرد آن

تهیه محلول بندکیت

 طرز تهيه: ۱۷۳ گرم نیترات سدیم و ۱۰۰گرم کربنات  سدیم بی آب را در۸۰۰ سی سی آب مقطر به کمک گرما حل می کنیم .در صورت لزوم از صافي مي گذرانيم و حجم محلول را به ۸۵۰ميلي ليتر مي رسانيم در ظرف دیگری ۳/۱۷ گرم سولفات مس متبلوررا در ۱۰۰ سی سی آب مقطر حل کرده به تدریج  به محلول اول اضافه می کنیم و حجم محلول را به یک لیتر می رسانیم

كاربرد: معرف قند هاي احياء كننده كه توليد رسوب قرمز آجري مي شود.(مونوساكاريد ها ،مالتوز ولاكتوز)

۵ ميلي ليتر ازمحلول بنديكت به محلول مورد نظر مي ريزيم ومحلول را حرارت مي دهيم تا بجوشد وتوليد رسوب قهوه اي آجري رنگ ملاكي براي شناسايي قند ساده مثل گلوكز است توجه :ساكارز قند احياء كننده نيست

طرز تهیه محلول لوکاس  و کاربرد آن

تهیه محلول لوکاس

 طرز تهيه: ۱۷گرم کلرید روی بدون آب مذاب شده را در ۵/۱۱ میلی لیتر محلول  Hcl ۳۷ ٪حل کرده و به هم زده و بعد در دسیکاتور خشک شده و دیگر بخارات اسید از آن بلند نشود استفاده می کنیم.

 كاربرد: برای تشخیص انواع الکل ها

طرز تهیه معرف شیف

تهیه معرف شیف

 طرز تهيه: ۱/۰گرم فوشین در ۱۰۰ سی سی آب مقطر به این محلول گاز  so2 سولفیت سدیم و کمی  Hcl  اضافه می کنیم .

طرز تهیه  محلول رقيق كننده گلبول های سفيد خون= محلول لازايس و کاربرد آن

محلول رقيق كننده گلبول های سفيد خون= محلول لازايس

   طرز تهیه :   ۲ ميلي ليتر اسيد استيك گلاسيال را در ۱۰۰ ميلي ليتر آب حل وسپس يك ميلي ليترمحلول ۵/۰درصد متيلن بلو به آن اضافه مي كنيم

 كاربرد: رقيق كردن خون،شمارشWBC

طرز تهیه  محلول رقيق كننده گلبول های قرمز خون= محلول هاين و کاربرد آن

محلول رقيق كننده گلبول های قرمز خون= محلول هاين

  طرز تهیه  :   ۵/۱۲ گرم سولفات سديم را در ۱۰۰ ميلي ليتر اب حل وسپس به آن ۳/۳۳ميلي ليتر اسيد استيك گلاسيال اضافه مي كنيم وحجم محلول را به ۲۰۰ميلي ليتر مي رسانيم

 كاربرد:رقيق كردن خون،شمارشRBC

طرز تهیه محلول جهت شمارش گلبول های قرمز

محلول جهت شمارش گلبول های قرمز

  طرز تهیه :  ۱/۰ گرم نمک طعام ، ۵/۳ گرم سولفات سدیم ، ۲۵/۰گرم کلرور جیوه ، حجم آن ها را با  آب مقطر به ۱۰۰ سی سی می رسانیم .

طرز تهیه  معرف بیوره و کاربرد آن

تهیه معرف بیوره

 طرز تهيه: ۴گرم سود را در۵۰۰ سی سی آب مقطر حل می کنیم سپس۳گرم سولفات مس آبدار به آن اضافه کرده پس از افزودن ۵ گرم یدور پتاسیم به محلول ۹گرم تارتارات مضاعف سدیم و پتاسیم اضافه کرده و خوب هم زده محلول حاصله آبی رنگ است.

توجه :در صورت ظاهر شدن رسوب سیاه یاقرمز محلول،خراب است.

 كاربرد:معرف پروتئين (درمجاورت محلول آبي پروتئين به رنگ بنفش در مي آيد

طرز تهیه كاغذ PTC  : آزمايش چشايي و کاربرد آن

كاغذ PTC  : آزمايش چشايي

 طرز تهيه: از پودر خشك ماده فنيل تيوكارباميد محلول يك در هزار تهيه مي كنيم، سپس كاغذ صافي را به صورت باريكه اي ۱×۵ سانتيمتر بريده و آنها را در محلول فرو مي بريم و در جايي آويزان كرده تا خشك شود.

كاربرد:استفاده درحس چشايي

طرز تهیه استيك الكل

استيك الكل

طرز تهيه: ۲۵ميلي ليتر اسيد استيك گلاشيال ( يخي ) به اضافه ۷۵ ميلي ليتر الكل صنعتي يا اتانول.